技術文章
Technical articles
熱門搜索：
Fitzgerald Industries International代理
Envirologix 轉基因快速檢測試紙
Epitomics現貨抗體目錄
ABgene代理30
EVE™ Slide（EVE細胞計數板）
Cayman Chemical 特約代理
法國ID-VET
Sinobio公司產品介紹
美國Sutter 玻璃毛坯 BF100-50-10
genview
D12079BWestern Diet(高純度飼料)
polysciences公司中國總代理
TEAA Solution（貨號：553303;SP5890）
LSPN-50ABMI公司LYSOSTAPHIN中國總代理
Abcam代理
天然小鼠補體C1q蛋白
更新時間：2016-02-16
點擊次數：2001
世界*實驗材料供應商 Worthington Biochemical 正式授權上海起發為其中國代理， Worthington Biochemical 在一直是行業的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產品和服務,上海起發一直秉承為中國科研客戶帶來的產品，的服務，簽約 Worthington Biochemical 就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產品和服務,您的滿意將是我們zui大的收獲
Worthington Biochemical 中國代理, Worthington Biochemical 上海代理， Worthington Biochemical 北京代理，Worthington Biochemical 廣東代理， Worthington Biochemical 江蘇代理Worthington Biochemical 湖北代理,Worthington Biochemical 天津,Worthington Biochemical 黑龍江代理,Worthington Biochemical 內蒙古代理,Worthington Biochemical 吉林代理,Worthington Biochemical 福建代理, Worthington Biochemical 江蘇代理, Worthington Biochemical 浙江代理,Worthington Biochemical 四川代理,
Worthington組織消化指南
引言
組織消化酶主要用于組織培養和細胞生物學研究的原代細胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經普遍應用多年，但是對其組織消化和細胞收集的作用機制卻沒有全面的理解。 由此導致的結果便是選擇一種消化方法大多是隨機選擇或基于過去的經驗，而不是在*理解消化原理的基礎上選擇的消化方案，以及如何根據具體實驗目的修正消化方案以獲得更好的實驗結果。
細胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個細胞，而影響結果的原因有很多，包括（不限于）以下：
1、組織類型
2、物種來源
3、動物年齡
4、遺傳改造情況（如knockouts）
5、所用的消化培養液
6、所用的酶
7、消化酶中的雜質
8、所用消化酶的工作濃度
9、溫度
10、孵育時間
通常前四個原因沒辦法選擇，而剩下的原因一般由經驗決定以獲取zui適實驗結果。
通過查閱文獻來選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實驗數據搞得一頭霧水。這些巨大差異來源于組織胞外基質的復雜而動態的特性，以及過去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外，組織胞外基質由各種蛋白、糖蛋白、脂類和糖脂組成，這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發育（年齡）之間存在明顯的差異，這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶，如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。
本指南總結了目前常用組織消化酶的zui適消化和細胞收集知識和方法，描述了標準的實驗步驟， 以便于制定一個*的細胞分離方案，同時列舉了一些相關的參考文獻。
下表列出多種組織的適宜消化酶（含參考文獻，以組織類型和物種分類，詳見鏈接）
脂肪組織 | 腎上腺組織 | 骨組織 | 腦組織 |
軟骨組織 | 結腸組織 | 內皮組織 | 上皮組織 |
眼 | 心臟 | 腸 | 腎 |
肝 | 肺 | 淋巴結 | 乳腺 |
其它組織 | 其他組織 | 肌組織 | 神經組織 |
胰腺 | 腮腺 | 垂體 | 前列腺 |
生殖 | 動物鱗片 | 皮膚 | 脾臟 |
干細胞 | 胸腺 | 甲狀腺/甲狀旁腺 | 扁桃體 |
腫瘤 |
|
|
|
注：使用Worthington公司消化酶的文獻不限于上表鏈接中所列，一般而言，Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化。
脾臟組織消化手冊
| 物種 | 詳細來源 | 細胞名稱 | 消化用酶 | 培養基 | 參考文獻 |
| 小鼠 | 小鼠 | Splenic | Collagenase Type 2: 0.1% | PBS | Klebanoff, C., Spencer, S., Torabi-Parizi, P., Grainger, J., Roychoudhuri, R., Ji, Y., Sukumar, M., Muranski, P., Scott, C., Hall, J., Ferreyra, G., Leonardi, A., Borman, Z. et al.: Retinoic Acid Controls the Homeostasis of Pre-cDC-Derived Splenic and Intestinal Dendritic Cells., J Exp Med 210, 1961, 2013 |
| 小鼠 | 小鼠 | Splenocytes | Collagenase Type 2: 0.16% | PBS | Yi, T. and Cyster, J.: EBI2-Mediated Bridging Channel Positioning Supports Splenic Dendritic Cell Homeostasis and Particulate Antigen Capture.,Elife Vol. 2,, , e00757, 2013 |
| Deoxyribonuclease I: 0.002% | |||||
| 小鼠 | 小鼠 | Spleen, bone marrow endothelial | Collagenase Type 4: 0.3-1.0% | PBS | Shi, C., Jia, T., Mendez-Ferrer, S., Hohl, T., Serbina, N., Lipuma, L., Leiner, I., Li, M., Frenette, P. and Pamer, E.: Bone Marrow Mesenchymal Stem and Progenitor Cells Induce Monocyte Emigration in Response to Circulating Toll-Like Receptor Ligands., Immunity 34, 590, 2011 |
| Deoxyribonuclease I: 20 u/ml | |||||
| 小鼠 | 小鼠, 雌性, 6-8 week | Dendritic | Collagenase Type 4: 0.05% | RPMI 1640 | Abou Fakher, F., Rachinel, N., Klimczak, M., Louis, J. and Doyen, N.: TLR9-Dependent Activation of Dendritic Cells by DNA from Leishmania Major Favors Th1 Cell Development and the Resolution of Lesions., J Immunol 182, 1386, 2009 |
| 小鼠 | 小鼠 | Dendritic | Collagenase Type 1: 0.5% | HBSS | Flano, E., Jewell, N., Durbin, R. and Durbin, J.: Methods Used to Study Respiratory Virus Infection.,Curr Protoc Cell Biol Vol. Chapter 26,, , Unit 26.3, 2009 |
| 小鼠 | 小鼠 | Dentritic | Collagenase: 300 u/ml | RPMI 1640 | Abe, K., Nguyen, K., Fine, S., Mo, J., Shen, C., Shenouda, S., Corr, M., Jung, S., Lee, J., Eckmann, L. and Raz, E.: Conventional Dendritic Cells Regulate the Outcome of Colonic Inflammation Independently of T Cells., Proc Natl Acad Sci U S A 104, 17022, 2007 |
| Deoxyribonuclease I: 0.002% | |||||
| 小鼠 | 小鼠 | Splenic | Collagenase Type 2: 0.1% | RPMI | Mueller, S., Matloubian, M., Clemens, D, Sharpe, A., Freeman, G., Gangappa, S., Larsen, C. and Ahmed, R.: Viral Targeting of Fibroblastic Reticular Cells Contributes to Immunosuppression and Persistence During Chronic Infection., Proc Natl Acad Sci U S A 104, 15430, 2007 |
| Deoxyribonuclease I: 0.1% | |||||
| 小鼠 | 小鼠 | Splenic stromal | Collagenase Type 3: 100-400 u/ml | HBSS | Benedict Chris A, De Trez Carl, Schneider Kirsten, Ha Sukwon, Patterson Ginelle, Ware Carl F:Specific remodeling of splenic architecture by cytomegalovirus, PLoS Pathog 2, e16, 2006 |
| 小鼠 | 小鼠 | Leukocytes | Collagenase Type 4: 43 u/ml | RPMI 1640 | Siragam, V., Crow, A., Brinc, D., Song, S., Freedman, J. and Lazarus, A.: Intravenous Immunoglobulin Ameliorates ITP via Activating Fc Gamma Receptors on Dendritic Cells., Nat Med 12, 688, 2006 |
| 小鼠 | 小鼠, 4-6 周 | Dentritic | Collagenase Type 1: 0.1% | RPMI-1640 | McLellan AlexanderD, Kapp Michaela, Eggert Andreas, Linden Christian, Bommhardt Ursula, Br枚cker Eva-B, K盲mmerer Ulrike, K盲mpgen Eckhart: Anatomic location and T-cell stimulatory functions of mouse dendritic cell subsets defined by CD4 and CD8 expression, Blood 99, 2084-93, 2002 |
| Deoxyribonuclease I: 0.001% | |||||
| 小鼠 | 小鼠 | Dentritic | Collagenase Type 3: 0.1% | RPMI 1640 | Schiavoni, F, Mattei, F, Sestili, P, Borghi, P, Venditti, M, Morse, H, Belardelli, F, and Gabrieli, L:ICSBP is Essential for the Development of Mouse Type I Interferon-producing Cells and for the Generation and Activation of CD8a+ Dendritic Cells, J Exp Med 196, 1415, 2002 |
| Deoxyribonuclease I: 325 u/ml | |||||
| 小鼠 | 小鼠 | Dentritic | Collagenase: 100 u/ml | HBSS | Brasel K, De Smedt T, Smith JL, Maliszewski CR: Generation of murine dendritic cells from flt3-ligand-supplemented bone marrow cultures, Blood 96, 3029-39, 2000 |
我們公司zui大優勢是強大的采購，
1：基本什么都能進口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進口的，
2：貨品全，現經營過700多個品牌，基本所有生物試劑耗材都可以進口，特別是冷偏的產品那就更有優勢，
3：提供加急服務，一般1-2周到貨，超過時限加急費全免
4：價格公道，絕大部分價格有優勢，當然不能保證100%產品都是,因為意味著沒有服務.
5：良好的信譽，大部分客戶我們提供貨到付款服務，客戶包括清華，北大 交大 復旦，中山等100多所大學，ROCHE，阿斯利康，國藥 ，fisher等500多家公司
6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Worthington Biochemical ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Worthington Biochemical , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。
7：我們還是invitrogen,qiagen,Worthington Biochemical am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發，歡迎合作。
當前位置：
