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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章KPL5120-0077:高靈敏即用型顯色底物,ELISA/WB實(shí)驗(yàn)黃金標(biāo)準(zhǔn)

KPL5120-0077:高靈敏即用型顯色底物,ELISA/WB實(shí)驗(yàn)黃金標(biāo)準(zhǔn)

更新時(shí)間:2025-04-23點(diǎn)擊次數(shù):1186

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一、產(chǎn)品概述  

KPL 5120-0077(SureBlue TMB Microwell Substrate)是一款基于3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的單組分即用型顯色底物,專為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)設(shè)計(jì)。該產(chǎn)品通過過氧化物酶(HRP)催化反應(yīng)生成深藍(lán)色產(chǎn)物,酸化終止后轉(zhuǎn)為黃色,適用于高靈敏度定量檢測,廣泛用于科研、臨床診斷和生物制藥領(lǐng)域。  


二、核心特性與技術(shù)優(yōu)勢  

1. 超高靈敏度  

  - 檢測靈敏度達(dá)0.4 ng/mL HRP標(biāo)記物,優(yōu)于傳統(tǒng)底物(如ABTS),尤其適用于低豐度靶標(biāo)(如細(xì)胞因子、病毒抗原)的檢測。  

  - 顯色反應(yīng)迅速,室溫孵育5-30分鐘即可獲得穩(wěn)定信號,支持高通量實(shí)驗(yàn)需求。  

2. 穩(wěn)定性  

  - 采用KPL配方,批次間差異小于15%,2-8℃避光保存有效期長達(dá)24個(gè)月,確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。  

  - 即用型設(shè)計(jì):無需預(yù)混或稀釋,直接加入反應(yīng)體系,減少操作誤差。  

3. 廣泛兼容性  

  - 適配HRP標(biāo)記的二抗、鏈霉親和素-生物素復(fù)合物等,支持ELISA、Western Blot、免疫組化(IHC)等多種實(shí)驗(yàn)平臺。  

  - 可搭配KPL膜增強(qiáng)劑(Detector Block, 71-83-00)優(yōu)化Western Blot弱信號檢測。  

4. 安全環(huán)保  

  - 不含二甲基亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)等有害溶劑,符合實(shí)驗(yàn)室安全標(biāo)準(zhǔn)。  


三、應(yīng)用場景與實(shí)驗(yàn)方案  

1. ELISA檢測  

- 功能:作為顯色底物用于檢測抗體效價(jià)、細(xì)胞因子(如IL-6、TNF-α)、病毒抗原(如SARS-CoV-2核衣殼蛋白)等。  

- 案例:在傳染病診斷中,可精準(zhǔn)檢測低至0.4 ng/mL的病原體蛋白,助力早期診斷。  

2. Western Blot增強(qiáng)檢測  

- 配套試劑:結(jié)合KPL封閉劑(如10% BSA Diluent/Blocking Solution, 50-61-00)或Milk Diluent(50-82-01),可降低非特異性背景,提升低表達(dá)蛋白的可視化效果。  

- 操作建議:顯色后立即酸化終止,10分鐘內(nèi)完成吸光度讀取以避免信號衰減。  

3. 多重檢測平臺  

- 兼容熒光標(biāo)記系統(tǒng),支持多靶標(biāo)同步檢測,適用于復(fù)雜樣本分析(如腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測)。  


四、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化指南  

1. 反應(yīng)條件控制  

  - 孵育時(shí)間:根據(jù)靶標(biāo)濃度調(diào)整(高濃度樣本建議5-10分鐘,避免過曝)。  

  - 終止液選擇:推薦1N硫酸或同類酸性溶液,終止后10分鐘內(nèi)讀取結(jié)果。  

2. 封閉方案優(yōu)化  

  - 使用KPL封閉劑(如10% BSA或Milk Diluent)可減少非特異性結(jié)合。  

  - 若背景信號偏高,可延長封閉時(shí)間至1小時(shí)或更換封閉劑類型。  

3. 儲存與穩(wěn)定性  

  - 2-8℃避光保存,避免反復(fù)凍融;開封后建議分裝使用以延長穩(wěn)定性。  


五、KPL品牌的技術(shù)積淀  

KPL成立于1982年,是實(shí)現(xiàn)親和素純化二抗商業(yè)化的生物技術(shù)公司,2013年被診斷試劑SeraCare收購后,進(jìn)一步整合資源強(qiáng)化技術(shù)優(yōu)勢。其核心創(chuàng)新包括:  

- 親和純化技術(shù):通過層析去除雜蛋白,二抗特異性提升50%。  

- 底物開發(fā)經(jīng)驗(yàn):TMB底物配方優(yōu)化,穩(wěn)定性較競品提升30%。  


六、技術(shù)支持與采購信息  

作為KPL中國區(qū)授權(quán)代理商,上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司提供以下支持:  

- 正品保障:原廠直供,提供技術(shù)認(rèn)證文件與售后質(zhì)量承諾。  

- 現(xiàn)貨儲備:上海浦東倉庫常備5120-0077等全線產(chǎn)品,支持加急物流(1-2周到貨)。  

- 實(shí)驗(yàn)方案指導(dǎo):針對ELISA/WB等復(fù)雜需求提供定制化技術(shù)支持。  


七、總結(jié)  

KPL 5120-0077憑借高靈敏度、穩(wěn)定性和即用型設(shè)計(jì),成為免疫檢測領(lǐng)域的產(chǎn)品。其廣泛兼容性可滿足科研與工業(yè)質(zhì)檢的多樣化需求,而上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑的高效供應(yīng)鏈與專業(yè)服務(wù)則為用戶提供了可靠保障。  


(注:技術(shù)參數(shù)基于KPL品牌資料整理,具體以品牌說明書為準(zhǔn)。)



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