microgembio PUN0050說(shuō)明書(shū)

prepGEM Universal

prepGEM通用

從血液，唾液和組織（包括動(dòng)物的拳頭，老鼠的尾巴，昆蟲(chóng)）和細(xì)胞培養(yǎng)物中提取DNA

產(chǎn)生用于STR，PCR，qPCR，全基因組擴(kuò)增，擴(kuò)增子測(cè)序的單鏈DNA

使用NGS進(jìn)行CRISPR / Cas9基因編輯的理想選擇

每個(gè)提取試劑盒均包含prepGEM，Histosolv，BLUE緩沖液，RED +緩沖液和ORANGE +緩沖液

info產(chǎn)品代碼和價(jià)格

該圖顯示了100、500和1,000個(gè)反應(yīng)試劑盒

制備 GEM環(huán)球是MicroGEM的用于從血液，唾液和組織費(fèi)力高產(chǎn)DNA提取全面的解決方案。它也非常適合從細(xì)胞培養(yǎng)物中提取DNA。整個(gè)方法都在一個(gè)管中，可確保DNA不會(huì)丟失，因此，它在低細(xì)胞數(shù)提取方面表現(xiàn)出色。

該試劑盒是研究人員在CRISPR / Cas9基因編輯后對(duì)轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行確證基因分型的出色工具。

制備 GEM Universal通過(guò)簡(jiǎn)單的溫度變化激活即可利用我們的嗜熱蛋白酶。使用標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，整個(gè)過(guò)程很容易在單個(gè)試管中自動(dòng)化。可以對(duì)標(biāo)準(zhǔn)熱循環(huán)儀進(jìn)行編程以進(jìn)行提取。

• 流線型方法可在約15分鐘內(nèi)提供DNA
• 不含抑制劑的解決方案意味著無(wú)需進(jìn)行苛刻的化學(xué)清洗或多個(gè)步驟
• 封閉管萃取可保護(hù)樣品的完整性
• 簡(jiǎn)化的手動(dòng)工作流程節(jié)省了技術(shù)人員的時(shí)間，降低了實(shí)驗(yàn)室成本，并顯著減少了危險(xiǎn)/塑料廢物

細(xì)胞培養(yǎng)

MicroGEM的一步法，閉管，溫度控制的裂解和提取是從培養(yǎng)細(xì)胞中進(jìn)行無(wú)損DNA提取的可靠解決方案。

處理培養(yǎng)的細(xì)胞時(shí)，通常需要從大量小體積樣品中分離DNA。這些不是MicroGEM提取的限制。

通過(guò)CRISPR / Cas9執(zhí)行基因編輯時(shí)，需要使用下一代測(cè)序（NGS）進(jìn)行基因分型，以確認(rèn)目標(biāo)基因已成功修飾。此任務(wù)需要使用很少的單元格。使用常規(guī)純化技術(shù)費(fèi)力，昂貴且困難

制備 GEM Universal可提供從200,000個(gè)細(xì)胞到單個(gè)細(xì)胞的線性結(jié)果。工作體積可以縮放至亞微升體積，非常適合處理低細(xì)胞數(shù)。速度，產(chǎn)量和完整性使  pre- GEM Universal成為細(xì)胞研究人員進(jìn)行基因編輯和表達(dá)的理想核酸提取方法。

許多大學(xué)，研究醫(yī)院，政府機(jī)構(gòu)和私人公司已將GEM Universal 制備品納入其工作流程。由于MicroGEM提取緩沖液與下游反應(yīng)兼容，因此非常需要單步，閉管溫度控制的裂解和提取。引物和PCR試劑無(wú)需進(jìn)一步純化即可直接添加到提取物中。

有關(guān)從培養(yǎng)細(xì)胞中提取RNA的信息，請(qǐng)參閱我們的RNAGEM產(chǎn)品。

CRISPR / Cas9

Zhang，Y.，Schmid，B.，Nielsen，TT，Nielsen，JE，Clausen，C.，Hyttel，P.，。。。Freude，KK（2016）。通過(guò)CRISPR-Cas9介導(dǎo)的CHMP2B中位點(diǎn)特異性純合突變的整合，產(chǎn)生人誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞系。 干細(xì)胞研究，17（1），151-153。doi：10.1016 / j.scr.2016.06.005。（基因分型）（pdf）

Yang，L.，Yang，JL，Byrne，S.，Pan，J.，＆Church，GM（2014）。CRISPR / Cas9指導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞的基因組編輯。 分子生物學(xué)的新方案。doi：10.1002 / 0471142727.mb3101s107。（協(xié)議3）（pdf）

昆蟲(chóng)

昆蟲(chóng)吃掉了世界上重要的谷物作物的5-20％。此外，與昆蟲(chóng)有關(guān)的媒介傳播疾病占所有傳染病的17％以上，每年造成700,000多例死亡，以及數(shù)百萬(wàn)例登革熱，瘧疾，錐蟲(chóng)病，萊姆病等。

如果及時(shí)采取干預(yù)措施和預(yù)防策略，大部分破壞和疾病是可以預(yù)防的。有害生物昆蟲(chóng)種類的鑒定通常需要成年階段的樣品。然而，分子方法的進(jìn)步允許使用蟲(chóng)卵并在幼蟲(chóng)期對(duì)昆蟲(chóng)進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。

在物種一級(jí)識(shí)別昆蟲(chóng)很重要的原因有很多，例如指導(dǎo)殺蟲(chóng)劑控制措施，識(shí)別檢疫性有害生物和區(qū)分疾病媒介昆蟲(chóng)。這些類型的評(píng)估需要在保持高吞吐率的同時(shí)，具有很高的準(zhǔn)確性。

當(dāng)樣品材料非常小且難以操作時(shí)，例如昆蟲(chóng)的腿，幼蟲(chóng)和/或卵，DNA提取過(guò)程通常很復(fù)雜。從歷*看，從少量樣品中提取DNA可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量和質(zhì)量發(fā)生巨大變化。

老鼠或老鼠的尾巴

生物醫(yī)學(xué)研究經(jīng)常使用嚙齒動(dòng)物作為動(dòng)物模型。在許多情況下，動(dòng)物的精確基因型是必需的，但通常此步驟很耗時(shí)。

隨著生成數(shù)據(jù)所需的動(dòng)物數(shù)量增加，試劑和人工成本可能變得過(guò)高。此問(wèn)題可以通過(guò)高效，低成本的DNA提取解決。

PDQeX prepGEM Universal是一種自動(dòng)化解決方案，可在低成本的自動(dòng)化系統(tǒng)中生產(chǎn)高質(zhì)量的DNA。DNA是PCR和qPCR的理想選擇，并且與qPCR / HRM相比，可比判斷動(dòng)物遺傳距離更可靠地用于對(duì)動(dòng)物進(jìn)行性別鑒定。

應(yīng)用說(shuō)明：使用prep GEM 進(jìn)行小鼠基因分型的快速，可靠的DNA prep

血液–生命科學(xué)

制備 GEM Universal利用我們的嗜熱蛋白酶，通過(guò)簡(jiǎn)單的溫度變化即可激活它。使用標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，整個(gè)過(guò)程很容易在單個(gè)試管中自動(dòng)化。可以對(duì)標(biāo)準(zhǔn)熱循環(huán)儀進(jìn)行編程以進(jìn)行提取。

將MIcroGEM的溫度控制，封閉管，簡(jiǎn)化的萃取與使用多步，去污劑和變性劑的常規(guī)方法進(jìn)行比較

示例結(jié)果：液體血液提取

使用PDQeX prep GEM試劑盒提取5 µl EDTA BDVacutainer®的全血和手指刺的新鮮血液。5 µl提取物（總體積100 µl）用于20 µl qPCR反應(yīng)。這兩個(gè)樣本的圖如下所示。

BRCA 1，qPCR圖顯示濃度為10 ng / µl，2 ng / µl，0.4 ng / µl，0.08 ng / µl的人類男性標(biāo)準(zhǔn)DNA（紅色）的新鮮血液（黑色）和EDTA（藍(lán)色）。